激光共聚焦显微镜PPT课件下载

这是一个关于激光共聚焦显微镜PPT课件，包括了激光扫描共聚焦显微镜成像的基本原理，激光扫描共聚焦显微镜的基本结构，激光扫描共聚焦显微镜的应用，量子点技术及其在生命科学研究中的应用等内容。激光扫描共聚焦显微镜技术（Laser scanning Confocal Microscopy，简称LSCM）是近代生物医学图象仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。广泛应用于细胞生物学、生理学、病理学、解剖学、组织胚胎学、免疫学和神经生物学等领域，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究具有很大的优越性，为这些领域新一代强有力的研究工具，欢迎点击下载激光共聚焦显微镜PPT课件。

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激光扫描共聚焦显微镜技术（Laser scanning Confocal Microscopy，简称LSCM）是近代生物医学图象仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。广泛应用于细胞生物学、生理学、病理学、解剖学、组织胚胎学、免疫学和神经生物学等领域，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究具有很大的优越性，为这些领域新一代强有力的研究工具。 Fluorescent Microscope Confocal Principle Differences between conventional and confocal microscope 共聚焦显微镜的主要优点高分辨率：图像与对比度增强，使用短波长的紫外光，大大提高了分辩率。是普通荧光显微镜分辨率的1.4倍（0.51/0.37) 共聚焦显微镜应用常见错误认识 在实际应用中尽管几乎所有标本都采用的是荧光标记， 但决不能将LSCM认为就是一种“高质量图像的荧光显微镜”. 共聚焦显微镜并不总是荧光检测的最好工具。 共聚焦显微镜能同时或序贯检测多种荧光通道，但不能将共聚焦显微镜简单地作为一种共存研究的工具。 共聚焦显微镜真正的威力是依赖于其强烈抑制焦平面外荧光信号的能力，有很好的深度分辨能力或光学切片功能。基于该性质的应用包括: 样品的显微断层扫描 (microscopic CT) Z扫描切片的3-D 重建厚样品的分辨率 多通道同时检测，可实时检测细胞的生理活动和形态变化: 生理学研究：如细胞内各种离子浓度随时间的变化情况. 活细胞多种标记物同时进行成像，动态观察不同形态学事件的发生。如分泌颗粒的分泌过程。 A confocal optical section demonstrates that during telophase， microtubules (red) form a phragmoplast(桶状纺缍体 ) array and peroxisomes (green) aggregate immediately inside these.  The DNA in the nuclei is stained blue.  Image from Collings et al. (2003). The role of hyaluronan in renal stone disease http://www.glycoforum.gr.jp/science/hyaluronan/HA29/HA29E.html Hyaluronan is expressed by proliferating renal tubular cells in subconfluent cultures (2 days post-seeding). At cell-cell contact (4 days post-seeding) this staining starts to fade away to completely disappear when the tight junctions are assembled (5-6 days post-seeding). The hyaluronan receptor CD44 is also expressed at the luminal surface in subconfluent cultures (2 days post-seeding)， at cell-cell contact CD44 is targeted to lateral spaces， whereas at confluence (6 days post-seeding)， CD44 is exclusively expressed at basal domains of the plasma membrane. 量子点具有较大的斯托克位移和狭窄对称的荧光谱 A QD-EGF binds and activates cells expressing a GFP-fused EGFR. (a) Red QD-EGF and green GFP-EGFR colocalize on the cell membrane within minutes and (b) are rapidly internalized together into endosomes in the cytoplasm. (c) Individual receptors on long sensory filaments called filopodia can be visualized by QD-EGF binding. Images are single confocal sections through living cells. Snapshots in time showing retrograde transport of QD-EGF-receptor-activated complexes on a filopodium 还可进行脉冲追踪实验(pulse-chase experiments)，观察融合内体的寿命. In pulse-chase experiments using two different colors of QD-EGF， binding and endocytosis of orange QD-EGF by EGFR was followed 22min later by blue QD-EGF. Few endosomes contain both colors of QDs (purple dots) when the pulses are separated by more than 15min 通过与特定蛋白质偶联(如萤虫素酶)，形成生物传感器，测定生物体内物质的特性 生物芯片技术：量子点色彩的多样性满足了对生物高分子（蛋白质、DNA）所蕴含海量信息进行分析的要求：用量子点检测肿瘤细胞小结 总的来说，由于量子点技术有其独特的标记特点，它必将成为今后生物分子检测的尖端技术，为DNA 检测(DNA 芯片) 、蛋白质检测(蛋白质芯片) 和探索蛋白质－蛋白质之间(抗原－抗体、配体－受体、酶－底物) 反应原理提供更先进的方法。同时也将极大的推动生物显像技术和生物制药技术的迅猛发展，给疾病的诊断和治疗带来巨大进步。TYB红软基地

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